ما هي حاسبة حجم إعادة التعليق؟
عندما يصلك ببتيد مجفف بالتجميد (lyophilized)، أو جسم مضاد، أو أوليغونوكليوتيد، أو بادئ (primer)، أو أي كاشف جاف، فأنت بحاجة إلى إضافة الكمية الصحيحة من المذيب للوصول إلى تركيز مخزون قابل للاستخدام. تخبرك هذه الحاسبة بالضبط بمقدار السائل الذي يجب إضافته. وهي تعيد ترتيب العلاقة البسيطة بين التركيز والكتلة بحيث يكون الحجم = الكتلة ÷ التركيز المطلوب، وتتولى تحويلات الوحدات تلقائيًا.
طريقة الاستخدام
أدخل كتلة المادة الجافة التي لديك (واختر وحدتها: نانوغرام، أو ميكروغرام، أو ملِّيغرام، أو غرام)، ثم أدخل التركيز الذي تريد أن يكون عليه المخزون النهائي (مع وحدته). تعطيك الحاسبة حجم المذيب بالملِّيلتر والميكرولتر معًا. أضف هذا الحجم من المحلول الواقي (buffer) أو المذيب الذي اخترته إلى القارورة، ثم امزجه برفق، فتحصل على مخزون بالتركيز المستهدف.
شرح المعادلة
يُعرَّف التركيز بأنه الكتلة لكل وحدة حجم: \( C = \dfrac{m}{V} \). وبحلّ المعادلة لإيجاد الحجم نحصل على $$ V = \dfrac{m}{C} $$ وداخليًا تحوّل الأداة كل كتلة إلى ميكروغرام وكل تركيز إلى ميكروغرام لكل ملِّيلتر قبل القسمة، بحيث يعطي أي مزيج من الوحدات نتيجة صحيحة.
مثال تطبيقي
لنفترض أن لديك 1 ملِّيغرام من الببتيد وتريد مخزونًا بتركيز 2 ملِّيغرام/ملِّيلتر. الحجم = $$ \frac{1\ \text{ملِّيغرام}}{2\ \text{ملِّيغرام/ملِّيلتر}} = 0.5\ \text{ملِّيلتر} = 500\ \text{ميكرولتر} $$ أضف 500 ميكرولتر من المذيب لتصل إلى تركيز 2 ملِّيغرام/ملِّيلتر.
الأسئلة الشائعة
أي مذيب ينبغي أن أستخدم؟ اتبع نشرة بيانات الشركة المصنّعة — ومن الخيارات الشائعة الماء المعقّم، أو محلول PBS، أو DMSO، أو محلول TE، تبعًا لنوع الجزيء.
هل تأخذ الحاسبة في الاعتبار الحجم الذي تشغله المادة الصلبة؟ لا. ففي الكواشف ذات المقياس المعتاد بالملِّيغرام يكون حجم المادة الصلبة ضئيلًا للغاية، لذا فإن حجم المذيب المضاف يساوي الحجم النهائي بدقة كافية.
ما فائدة وحدتي ميكروغرام/ملِّيلتر ونانوغرام/ملِّيلتر؟ كثيرًا ما تُحضَّر المخزونات البيولوجية المخفّفة (الأجسام المضادة، والمعايير القياسية) عند هذه التراكيز المنخفضة؛ ما عليك سوى اختيار الوحدة المناسبة.
