什么是等电点？
等电点（pI）是指分子（通常为氨基酸、多肽或蛋白质）所带净电荷为零时对应的 pH 值。在这一 pH 下，分子所带的正电荷与负电荷相互抵消，因此在电场中不会发生迁移。等电点是生物化学中的一个基本性质，广泛应用于蛋白质纯化（如等电聚焦）和色谱分析等领域。
如何使用本计算器
输入两个 pKa 值，它们应分别位于目标分子中性形式的两侧。对于不含可电离侧链的简单氨基酸来说，这两个值就是羧基的 pKa（pKa1，酸性较强）和氨基的 pKa（pKa2，酸性较弱）。计算器会立即取两者的算术平均值，给出 pI 结果。
公式详解
中性的两性离子（zwitterion）形式存在于两种带电形式之间。位于其下方的 pKa（pKa1）对应着 +1 形式失去一个质子的过程；位于其上方的 pKa（pKa2）则对应着中性形式失去一个质子、生成 −1 形式的过程。当 +1 形式与 −1 形式的数量相等时——也就是净电荷为零的那一点——对应的 pH 正好是两者的平均值：
$$\text{pI} = \dfrac{\text{pKa}_1 + \text{pKa}_2}{2}$$
计算示例
以甘氨酸为例，pKa1（COOH）≈ 2.34，pKa2（NH3+）≈ 9.60。其等电点为
$$\text{pI} = \dfrac{2.34 + 9.60}{2} = \dfrac{11.94}{2} = \mathbf{5.97}$$
这与甘氨酸广为人知的实验测定值完全吻合。
常见问题
我应该使用哪两个 pKa 值？ 请使用净电荷为零的那种形式两侧的两个 pKa 值。对于带有可电离侧链的氨基酸，应选取夹在中性形式两侧的那两个 pKa 值。
这个公式适用于蛋白质吗？ 这种简单的双 pKa 取平均的方法适用于小分子和不带电荷侧链的氨基酸。完整的蛋白质则需要将所有可电离基团的贡献逐一加和才能求出 pI。
等电点能告诉我什么？ 它表示分子溶解度最低、且在电场中不会迁移的那个 pH 值，对沉淀分离和等电聚焦等操作很有参考价值。
