Qué hace esta calculadora
Esta herramienta calcula la concentración molar de una sustancia en disolución a partir de su absorbancia medida, aplicando la ley de Beer-Lambert. Es un recurso muy utilizado en química analítica, bioquímica y espectrofotometría para convertir las lecturas de UV-Vis en valores de concentración con sentido práctico.
Cómo usarla
Introduce tres datos: la absorbancia (A), un valor adimensional que te proporciona el espectrofotómetro; la absortividad molar (ε), una constante característica del analito a la longitud de onda elegida, expresada en L·mol⁻¹·cm⁻¹; y el paso óptico (l), es decir, la anchura de la cubeta en centímetros (normalmente 1 cm). La calculadora devuelve la concentración en mol/L y, para mayor comodidad, también la convierte a micromolar (µM).
La fórmula explicada
La ley de Beer-Lambert establece que \(A = \varepsilon \cdot l \cdot c\). Si despejamos la concentración, obtenemos $$c = \frac{A}{\varepsilon \cdot l}$$ La absorbancia aumenta de forma lineal con la concentración siempre que la disolución no esté demasiado concentrada. La absortividad molar indica con qué intensidad absorbe la luz una especie química a una longitud de onda determinada, mientras que el paso óptico tiene en cuenta la distancia que recorre la luz a través de la muestra.
Ejemplo resuelto
Imagina que mides una absorbancia \(A = 0{,}63\) para una proteína a 280 nm, con una absortividad molar \(\varepsilon = 6300 \ \text{L}\cdot\text{mol}^{-1}\cdot\text{cm}^{-1}\) y una cubeta estándar de 1 cm. Entonces $$c = \frac{0{,}63}{6300 \times 1} = 0{,}0001 \ \text{mol/L} = 100 \ \mu\text{M}$$
Preguntas frecuentes
¿Qué unidades debo usar? Emplea L·mol⁻¹·cm⁻¹ para ε y cm para el paso óptico; así obtendrás la concentración en mol/L.
¿Por qué mi resultado es negativo o cero? Puede que necesites corregir la absorbancia con un blanco; comprueba también que ε y el paso óptico sean números positivos distintos de cero.
¿La ley se cumple siempre? La linealidad de Beer-Lambert se pierde a concentraciones altas (por lo general cuando A > 1) debido a la dispersión de la luz y a las interacciones entre moléculas del analito, así que diluye la muestra si hace falta.
