अवशोषकता से सांद्रता निकालने वाला कैलकुलेटर

गणना दर्ज करें

अवशोषकता (A)

मोलर अवशोषकता ε (L·mol⁻¹·cm⁻¹)

पाथ लेंथ l (cm)

परिणाम

सांद्रता

0.000079

mol/L (M)

माइक्रोमोलर में (µM)	79.37 µM
सूत्र	c = A / (ε · l)

यह कैलकुलेटर क्या करता है

यह टूल बीयर-लैम्बर्ट नियम का उपयोग करके किसी घोल में पदार्थ की मापी गई अवशोषकता (absorbance) से उसकी मोलर सांद्रता निकालता है। विश्लेषणात्मक रसायन विज्ञान (analytical chemistry), जैव रसायन (biochemistry) और स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री में UV-Vis रीडिंग को उपयोगी सांद्रता मानों में बदलने के लिए इसका व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है।

इसका उपयोग कैसे करें

तीन मान दर्ज करें: अवशोषकता (A), जो आपके स्पेक्ट्रोफोटोमीटर से मिली एक मात्रकहीन (dimensionless) रीडिंग है; मोलर अवशोषकता (ε), जो चुनी गई तरंगदैर्ध्य (wavelength) पर उस पदार्थ के लिए एक स्थिरांक है और L·mol⁻¹·cm⁻¹ में व्यक्त की जाती है; तथा पाथ लेंथ (l), यानी क्यूवेट की चौड़ाई सेंटीमीटर में (आमतौर पर 1 cm)। कैलकुलेटर सांद्रता को mol/L में देता है और सुविधा के लिए उसे माइक्रोमोलर (µM) में भी बदल देता है।

सूत्र की व्याख्या

बीयर-लैम्बर्ट नियम कहता है कि \(A = \varepsilon \cdot l \cdot c\)। सांद्रता के लिए इसे पुनर्व्यवस्थित करने पर निम्न प्राप्त होता है:

$$c = \frac{\text{Absorbance (A)}}{\text{Molar Absorptivity } \varepsilon \times \text{Path Length } l}$$

जब तक घोल बहुत अधिक गाढ़ा न हो, अवशोषकता सांद्रता के साथ रैखिक रूप से (linearly) बढ़ती है। मोलर अवशोषकता यह बताती है कि कोई रासायनिक प्रजाति किसी दी गई तरंगदैर्ध्य पर प्रकाश को कितनी तीव्रता से अवशोषित करती है, जबकि पाथ लेंथ यह दर्शाती है कि प्रकाश नमूने में से कितनी दूरी तय करता है।

अवशोषकता सांद्रता के रैखिक रूप से समानुपाती है, ढाल \(\varepsilon \cdot l\) के साथ।

प्रकाश घोल में पथ लंबाई \(l\) तय करते हुए अवशोषित होता है।

हल किया हुआ उदाहरण

मान लीजिए कि आप 280 nm पर किसी प्रोटीन की अवशोषकता \(A = 0.63\) मापते हैं, जिसकी मोलर अवशोषकता \(\varepsilon = 6300 \ \text{L}\cdot\text{mol}^{-1}\cdot\text{cm}^{-1}\) है और इसे एक मानक 1 cm क्यूवेट में मापा गया है। तब

$$c = \frac{0.63}{6300 \times 1} = 0.0001 \ \text{mol/L} = 100 \ \mu\text{M}$$

अक्सर पूछे जाने वाले प्रश्न

मुझे कौन-सी इकाइयाँ इस्तेमाल करनी चाहिए? सांद्रता mol/L में पाने के लिए ε के लिए L·mol⁻¹·cm⁻¹ और पाथ लेंथ के लिए cm का उपयोग करें।

मेरा परिणाम ऋणात्मक या शून्य क्यों आ रहा है? हो सकता है ब्लैंक अवशोषकता सुधार (blank correction) की आवश्यकता हो; साथ ही सुनिश्चित करें कि ε और पाथ लेंथ दोनों शून्य से अधिक धनात्मक संख्याएँ हों।

क्या यह नियम हमेशा लागू होता है? उच्च सांद्रता पर (आमतौर पर A > 1) प्रकीर्णन (scattering) और पदार्थों के आपसी प्रभाव के कारण बीयर-लैम्बर्ट की रैखिकता टूट जाती है, इसलिए ज़रूरत पड़ने पर नमूने को पतला (dilute) कर लें।