吸光度濃度計算器

輸入計算

吸光度（A）

莫耳吸光係數 ε（L·mol⁻¹·cm⁻¹）

光徑長度 l（cm）

結果

濃度

0.000079

mol/L（M）

換算為微莫耳濃度（µM）	79.37 µM
公式	c = A /（ε · l）

這個計算器的用途

本工具運用比爾–朗伯定律（Beer-Lambert law），由實測的吸光度推算出溶液中物質的莫耳濃度。在分析化學、生物化學與分光光度法中相當常用，能將紫外–可見光（UV-Vis）的讀數轉換成具有實際意義的濃度數值。

使用方法

請輸入三個數值：吸光度（A），即分光光度計上量到的無因次讀數；莫耳吸光係數（ε），是待測物在所選波長下的特性常數，單位為 L·mol⁻¹·cm⁻¹；以及光徑長度（l），也就是比色皿的寬度，單位為公分（一般為 1 cm）。計算器會回傳以 mol/L 表示的濃度，並順便換算成微莫耳濃度（µM），方便您直接使用。

公式說明

比爾–朗伯定律寫作 \(A = \varepsilon \cdot l \cdot c\)。將其對濃度移項整理後可得

$$c = \frac{A}{\varepsilon \cdot l}$$

只要溶液濃度不過高，吸光度便會與濃度呈線性正比關係。莫耳吸光係數代表某化學物種在特定波長下吸光的強弱程度，而光徑長度則反映光線穿透樣品的距離。

吸光度與濃度呈線性正比，斜率為 \(\varepsilon \cdot l\)。

光在溶液中經過光程 \(l\) 時被吸收。

範例計算

假設您在 280 nm 下量到某蛋白質的吸光度 \(A = 0.63\)，其莫耳吸光係數 \(\varepsilon = 6300\ \text{L}\cdot\text{mol}^{-1}\cdot\text{cm}^{-1}\)，並使用標準的 1 cm 比色皿。則

$$c = \frac{0.63}{6300 \times 1} = 0.0001\ \text{mol/L} = 100\ \unicode{x00B5}\text{M}$$

常見問題

該使用哪些單位？ε 請以 L·mol⁻¹·cm⁻¹ 為單位、光徑長度以 cm 為單位，這樣得到的濃度才會是 mol/L。

為什麼結果會是負值或零？可能需要先做空白（blank）吸光度的扣除校正；同時請確認 ε 與光徑長度都是大於零的正數。

這條定律是否永遠成立？當濃度過高（通常 \(A > 1\)）時，由於散射與待測物之間的交互作用，比爾–朗伯定律的線性關係會失效，因此必要時請先將樣品稀釋。