À quoi sert le calculateur de dilution de tampon ?
En laboratoire, les tampons sont souvent fournis ou conservés sous forme de solutions mères concentrées (comme le TBE 10X, le tampon de charge 5X ou le TAE 50X) afin de gagner de la place et d'améliorer leur stabilité. Avant utilisation, il faut les diluer jusqu'à une concentration de travail de 1X. Ce calculateur vous indique précisément quelle quantité de solution mère concentrée et quel volume de diluant (eau ou solvant) combiner pour atteindre le volume final dont vous avez besoin.
Comment l'utiliser
Saisissez le volume final total que vous souhaitez préparer ainsi que le facteur de concentration de votre solution mère (10 pour une solution 10X, 50 pour une solution 50X, et ainsi de suite). Le calculateur affiche le volume de solution mère concentrée à prélever et le volume de diluant à ajouter. La somme de ces deux volumes correspond toujours à votre volume final.
La formule expliquée
La dilution repose sur une relation toute simple : $$V_{m\text{è}re} = \frac{V_{final}}{\text{facteur}}$$ Le volume restant est celui du diluant : $$V_{eau} = V_{final} - V_{m\text{è}re}$$ Il s'agit d'une application directe de \(C_1 V_1 = C_2 V_2\), où le rapport des concentrations est égal au facteur de dilution.
Exemple concret
Pour préparer 100 mL de tampon 1X à partir d'une solution mère 10X : $$V_{m\text{è}re} = \frac{100}{10} = 10 \text{ mL}$$ de solution mère, et $$V_{eau} = 100 - 10 = 90 \text{ mL}$$ d'eau. Mélangez donc 10 mL de solution mère 10X avec 90 mL d'eau.
Concentrations standards des stocks de tampons de laboratoire
La plupart des tampons de biologie moléculaire sont stockés sous forme concentrée pour économiser l'espace et améliorer la durée de conservation, puis dilués à une concentration de travail 1X immédiatement avant utilisation. Le tableau ci-dessous énumère les tampons courants, le facteur de dilution auxquels leurs stocks sont généralement fournis ou préparés, et leur application usuelle en 1X.
| Tampon | Facteur de stock typique | Utilisation en travail 1X |
|---|---|---|
| TBE (Tris-Borate-EDTA) | 10X (ou 5X) | Tampon de migration pour électrophorèse sur gel d'agarose et polyacrylamide pour ADN/ARN |
| TAE (Tris-Acétate-EDTA) | 50X | Tampon de migration pour électrophorèse sur gel d'agarose ; préféré pour les grands fragments d'ADN et l'extraction en aval |
| PBS (Tampon phosphate salin) | 10X | Lavage des cellules, dilutions, et tampon isotonique pour les dosages biologiques |
| TE (Tris-EDTA) | 10X (souvent 100X) | Resuspension et stockage d'ADN/ARN (1X = 10 mM Tris, 1 mM EDTA) |
| Colorant de charge pour SDS-PAGE (Laemmli) | 5X (ou 4X, 6X) | Tampon de charge pour gels de protéines dénaturants |
| Tampon de charge pour gel (ADN) | 5X / 6X | Colorant de charge pour suivre la migration et ajouter de la densité lors du chargement d'échantillons d'ADN |
Les recettes exactes des stocks varient selon le fournisseur et le protocole ; confirmez toujours le facteur imprimé sur la bouteille avant de diluer. Pour préparer une solution 1X, divisez le volume final souhaité par le facteur de stock pour trouver le volume de concentré, puis ajoutez le diluant jusqu'au volume final.
Questions fréquentes
L'unité a-t-elle une importance ? Non : le résultat s'exprime dans l'unité de volume que vous saisissez (mL, µL, L), à condition de rester cohérent.
Puis-je diluer vers autre chose que du 1X ? Cet outil part du principe que la cible est 1X. Pour passer de 10X à 2X, divisez d'abord le facteur par votre cible (utilisez alors 5 comme facteur).
Pourquoi le volume de diluant est-il légèrement inférieur au volume final ? Parce que la solution mère concentrée apporte déjà une partie du volume ; le diluant correspond donc au volume final moins le volume de solution mère.
