什麼是緩衝液稀釋計算機?
實驗室的緩衝液通常以濃縮母液的形式販售或保存(例如 10X TBE、5X 上樣染劑或 50X TAE),以便節省空間並提升穩定性。使用前必須先稀釋成 1X 的工作濃度。這個計算機能精確告訴你,要混合多少濃縮母液與多少稀釋劑(水或溶劑),才能配製出你所需要的任何最終體積。
使用方法
輸入你想配製的總最終體積,以及母液的濃縮倍數(10X 母液填 10、50X 母液填 50,依此類推)。計算機會回傳你需要量取的濃縮母液體積,以及應加入的稀釋劑體積。這兩個體積相加,永遠等於你設定的最終體積。
公式解析
稀釋遵循一個簡單的關係式:
$$V_{\text{母液}} = \frac{V_{\text{最終}}}{\text{倍數}}$$剩餘的體積即為稀釋劑:
$$V_{\text{水}} = V_{\text{最終}} - V_{\text{母液}}$$這正是 \(C_1 V_1 = C_2 V_2\) 的直接應用,其中濃度比就等於稀釋倍數。
實例演算
若要以 10X 母液配製 100 mL 的 1X 緩衝液:
$$V_{\text{母液}} = \frac{100}{10} = 10 \text{ mL 母液}$$$$V_{\text{水}} = 100 - 10 = 90 \text{ mL 水}$$將 10 mL 的 10X 母液與 90 mL 的水混合即可。
標準實驗室緩衝液儲存濃度
大多數分子生物學緩衝液以濃縮液形式儲存以節省空間並延長保存期限,然後在使用前立即稀釋至1X工作濃度。下表列出了常見的緩衝液、其儲存液通常供應或製備的倍數,以及它們通常的1X應用。
| 緩衝液 | 典型儲存液倍數 | 1X工作用途 |
|---|---|---|
| TBE(三羥甲基氨基甲烷-硼酸-EDTA) | 10X(或5X) | DNA/RNA瓊脂糖凝膠及聚丙烯酰胺凝膠電泳用電泳緩衝液 |
| TAE(三羥甲基氨基甲烷-乙酸-EDTA) | 50X | 瓊脂糖凝膠電泳用電泳緩衝液;適合大型DNA片段和下游萃取 |
| PBS(磷酸鹽緩衝生理食鹽水) | 10X | 細胞洗滌、稀釋及生物檢測用等滲緩衝液 |
| TE(三羥甲基氨基甲烷-EDTA) | 10X(通常100X) | DNA/RNA重懸浮及儲存(1X = 10 mM三羥甲基氨基甲烷、1 mM EDTA) |
| SDS-PAGE 上樣用染料(Laemmli) | 5X(或4X、6X) | 變性蛋白質凝膠的樣品上樣緩衝液 |
| 凝膠上樣緩衝液(DNA) | 5X / 6X | 上樣染料用於追蹤遷移並在上樣DNA樣品時增加密度 |
精確的儲存液配方因供應商和方案而異;在稀釋前務必確認瓶上列印的倍數。若要配製1X溶液,將所需的最終體積除以儲存液倍數以找出濃縮液的體積,然後加入稀釋劑至最終體積。
常見問題
單位會影響結果嗎?不會——只要前後單位保持一致,結果就會以你輸入的體積單位呈現(mL、µL、L 皆可)。
可以稀釋成 1X 以外的濃度嗎?本工具預設目標為 1X。若要將 10X 稀釋成 2X,請先用倍數除以目標濃度(此例填入 5 作為倍數)。
為什麼稀釋劑會比最終體積略少?因為濃縮母液本身就佔了一部分體積,所以稀釋劑等於最終體積減去母液體積。