Tampon Seyreltme Hesaplayıcı nedir?
Laboratuvar tamponları, yer kazanmak ve raf ömrünü uzatmak için genellikle konsantre stoklar halinde (örneğin 10X TBE, 5X yükleme boyası veya 50X TAE) sağlanır ya da saklanır. Kullanmadan önce bu stokların 1X çalışma konsantrasyonuna seyreltilmesi gerekir. Bu hesaplayıcı, ihtiyaç duyduğunuz herhangi bir son hacme ulaşmak için tam olarak ne kadar konsantre stok ve ne kadar seyreltici (su veya çözücü) karıştırmanız gerektiğini size söyler.
Nasıl kullanılır?
Hazırlamak istediğiniz toplam son hacmi ve stokunuzun kat konsantrasyonunu girin (10X stok için 10, 50X stok için 50 ve benzeri). Hesaplayıcı, ölçmeniz gereken konsantre stok hacmini ve eklemeniz gereken seyreltici hacmini verir. Bu iki hacmin toplamı her zaman son hacminize eşittir.
Formülün açıklaması
Seyreltme, basit bir bağıntıyı izler: $$V_{stok} = \frac{V_{son}}{\text{kat}}$$ Kalan hacim seyrelticidir: $$V_{su} = V_{son} - V_{stok}$$ Bu, konsantrasyon oranının kat faktörüne eşit olduğu \(C_1 V_1 = C_2 V_2\) ilkesinin doğrudan bir uygulamasıdır.
Örnek hesaplama
10X stoktan 100 mL 1X tampon hazırlamak için: $$V_{stok} = \frac{100}{10} = 10 \text{ mL stok}$$ ve $$V_{su} = 100 - 10 = 90 \text{ mL su}.$$ 10 mL 10X stoku 90 mL su ile karıştırın.
Standart Laboratuvar Tamponu Stok Konsantrasyonları
Çoğu moleküler biyoloji tamponu, yeri tasarrufu sağlamak ve raf ömrünü iyileştirmek için yoğun stoklar olarak depolanır, ardından kullanımdan hemen önce 1X çalışma konsantrasyonuna seyreltilir. Aşağıdaki tablo yaygın tamponları, stoklarının tipik olarak tedarik edildiği veya hazırlandığı kat sayısını ve bunların olağan 1X uygulamasını listeler.
| Tampon | Tipik Stok Katı | 1X Çalışma Kullanımı |
|---|---|---|
| TBE (Tris-Borat-EDTA) | 10X (veya 5X) | DNA/RNA için agaroz ve poliakrilamid jel elektroforezi çalıştırma tamponu |
| TAE (Tris-Asetat-EDTA) | 50X | Agaroz jel elektroforezi çalıştırma tamponu; büyük DNA fragmanları ve akış aşağısı ekstraksiyon için tercih edilir |
| PBS (Fosfat Tamponlu Salin) | 10X | Hücre yıkama, dilüsyon ve biyolojik testler için izotonik tampon |
| TE (Tris-EDTA) | 10X (genellikle 100X) | DNA/RNA'nın yeniden süspansiyonu ve depolanması (1X = 10 mM Tris, 1 mM EDTA) |
| SDS-PAGE Yükleme Boyası (Laemmli) | 5X (veya 4X, 6X) | Denatüre protein jelleri için örnek yükleme tamponu |
| Jel Yükleme Tamponu (DNA) | 5X / 6X | DNA örnekleri yüklerken migrasyon izlemek ve yoğunluk eklemek için boyama |
Tam stok reçeteleri tedarikçi ve protokole göre değişir; seyreltmeden önce şişe üzerinde basılı olan katı sayısını her zaman onaylayın. 1X çözelti hazırlamak için istenen son hacmi stok katına bölün, konsantrenin hacmini bulun, ardından seyrelticiyi son hacme ekleyin.
Sıkça Sorulan Sorular
Birim önemli mi? Hayır — tutarlı kaldığınız sürece sonuç, girdiğiniz hacim biriminde (mL, µL, L) çıkar.
1X dışında bir konsantrasyona seyreltebilir miyim? Bu araç 1X hedefi varsayar. 10X'i 2X'e seyreltmek için önce katı hedefinize bölün (kat değeri olarak 5 kullanın).
Seyreltici neden son hacimden biraz daha az? Çünkü konsantre stok da hacme katkı sağlar; dolayısıyla seyreltici, son hacimden stok hacmi çıkarılarak bulunur.
