์์ถฉ์ก ํฌ์ ๊ณ์ฐ๊ธฐ๋?
์คํ์ค์์ ์ฌ์ฉํ๋ ์์ถฉ์ก(buffer)์ ๋ณด๊ด ๊ณต๊ฐ์ ์ค์ด๊ณ ์์ ์ฑ์ ๋์ด๊ธฐ ์ํด ๋์ถ ์คํก ํํ๋ก ์ ๊ณต๋๊ฑฐ๋ ๋ณด๊ด๋๋ ๊ฒฝ์ฐ๊ฐ ๋ง์ต๋๋ค(์: 10X TBE, 5X ๋ก๋ฉ ๋ค์ด, 50X TAE). ์ค์ ๋ก ์ฌ์ฉํ ๋๋ 1X ์์ ๋๋๋ก ํฌ์ํด์ผ ํ์ฃ . ์ด ๊ณ์ฐ๊ธฐ๋ ์ํ๋ ์ต์ข ๋ถํผ์ ๋ง์ถฐ ๋์ถ ์คํก๊ณผ ํฌ์์ก(๋ฌผ ๋๋ ์ฉ๋งค)์ ๊ฐ๊ฐ ์ผ๋ง๋ ์์ด์ผ ํ๋์ง ์ ํํ๊ฒ ์๋ ค์ค๋๋ค.
์ฌ์ฉ ๋ฐฉ๋ฒ
์ค๋นํ๋ ค๋ ์ด ์ต์ข ๋ถํผ์ ์คํก์ ๋์ถ ๋ฐฐ์(10X ์คํก์ด๋ฉด 10, 50X ์คํก์ด๋ฉด 50์ฒ๋ผ)๋ฅผ ์ ๋ ฅํ์ธ์. ๊ณ์ฐ๊ธฐ๋ ๋์ด๋ด์ผ ํ ๋์ถ ์คํก์ ๋ถํผ์ ์ถ๊ฐํ ํฌ์์ก์ ๋ถํผ๋ฅผ ์๋ ค์ค๋๋ค. ๋ ๋ถํผ๋ฅผ ํฉ์น๋ฉด ํญ์ ์ ๋ ฅํ ์ต์ข ๋ถํผ๊ฐ ๋ฉ๋๋ค.
๊ณ์ฐ ๊ณต์
ํฌ์์ ๋ค์์ ๊ฐ๋จํ ๊ด๊ณ๋ฅผ ๋ฐ๋ฆ ๋๋ค: $$V_{\text{์คํก}} = \frac{V_{\text{์ต์ข }}}{\text{๋ฐฐ์}}$$ ๋๋จธ์ง ๋ถํผ๊ฐ ํฌ์์ก์ด ๋ฉ๋๋ค: $$V_{\text{๋ฌผ}} = V_{\text{์ต์ข }} - V_{\text{์คํก}}$$ ์ด๋ ๋๋๋น๊ฐ ๊ณง ๋์ถ ๋ฐฐ์์ ๊ฐ์์ง๋ \(C_1 V_1 = C_2 V_2\) ๊ณต์์ ๊ทธ๋๋ก ์ ์ฉํ ๊ฒ์ ๋๋ค.
๊ณ์ฐ ์์
10X ์คํก์ผ๋ก 1X ์์ถฉ์ก 100 mL๋ฅผ ๋ง๋๋ ๊ฒฝ์ฐ: $$V_{\text{์คํก}} = \frac{100}{10} = 10 \text{ mL}$$ $$V_{\text{๋ฌผ}} = 100 - 10 = 90 \text{ mL}$$ ์ฆ, 10X ์คํก 10 mL์ ๋ฌผ 90 mL๋ฅผ ์์ผ๋ฉด ๋ฉ๋๋ค.
ํ์ค ์คํ์ค ๋ฒํผ ์คํก ๋๋
๋๋ถ๋ถ์ ๋ถ์์๋ฌผํ ๋ฒํผ๋ ๊ณต๊ฐ์ ์ ์ฝํ๊ณ ์ ํต๊ธฐํ์ ์ฐ์ฅํ๊ธฐ ์ํด ๋์ถ ์คํก์ผ๋ก ๋ณด๊ด๋์๋ค๊ฐ ์ฌ์ฉ ์ง์ ์ 1X ์์ ๋๋๋ก ํฌ์๋ฉ๋๋ค. ์๋ ํ์๋ ์ผ๋ฐ์ ์ธ ๋ฒํผ, ์คํก์ด ์ผ๋ฐ์ ์ผ๋ก ๊ณต๊ธ๋๊ฑฐ๋ ์ค๋น๋๋ ๋ฐฐ์, ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ์ผ๋ฐ์ ์ธ 1X ์ฉ๋๊ฐ ๋์ด๋์ด ์์ต๋๋ค.
| ๋ฒํผ | ์ ํ์ ์ธ ์คํก ๋ฐฐ์ | 1X ์์ ์ฉ๋ |
|---|---|---|
| TBE (Tris-Borate-EDTA) | 10X (๋๋ 5X) | DNA/RNA์ฉ ์๊ฐ๋ก์ค & ํด๋ฆฌ์ํฌ๋ฆด์๋ง์ด๋ ๊ฒ ์ ๊ธฐ์๋ ์คํ ๋ฒํผ |
| TAE (Tris-Acetate-EDTA) | 50X | ์๊ฐ๋ก์ค ๊ฒ ์ ๊ธฐ์๋ ์คํ ๋ฒํผ; ํฐ DNA ๋จํธ & ํ์ ์ถ์ถ์ ์ ํธ๋จ |
| PBS (์ธ์ฐ์ผ ์์ถฉ ์์ผ์) | 10X | ์ธํฌ ์ธ์ฒ, ํฌ์, ๋ฐ ์๋ฌผํ์ ๊ฒ์ ์ ์ํ ๋ฑ์ฅ์ฑ ๋ฒํผ |
| TE (Tris-EDTA) | 10X (์ข ์ข 100X) | DNA/RNA์ ์ฌํํ ๋ฐ ๋ณด๊ด (1X = 10 mM Tris, 1 mM EDTA) |
| SDS-PAGE ๋ก๋ฉ ์ผ๋ฃ (Laemmli) | 5X (๋๋ 4X, 6X) | ๋ณ์ฑ ๋จ๋ฐฑ์ง ๊ฒ์ ์ํ ๋ก๋ฉ ๋ฒํผ |
| ๊ฒ ๋ก๋ฉ ๋ฒํผ (DNA) | 5X / 6X | DNA ์ํ ๋ก๋ฉ ์ ์ด๋ ์ถ์ ๋ฐ ๋ฐ๋ ์ถ๊ฐ๋ฅผ ์ํ ๋ก๋ฉ ์ผ๋ฃ |
์ ํํ ์คํก ๋ ์ํผ๋ ๊ณต๊ธ์ ์ฒด ๋ฐ ํ๋กํ ์ฝ์ ๋ฐ๋ผ ๋ค๋ฅด๋ฏ๋ก ํฌ์ํ๊ธฐ ์ ์ ๋ณ์ ์ธ์๋ ๋ฐฐ์๋ฅผ ํญ์ ํ์ธํ์ธ์. 1X ์ฉ์ก์ ์ค๋นํ๋ ค๋ฉด ์ํ๋ ์ต์ข ๋ถํผ๋ฅผ ์คํก ๋ฐฐ์๋ก ๋๋์ด ๋์ถ์ก์ ๋ถํผ๋ฅผ ๊ตฌํ ๋ค์ ์ต์ข ๋ถํผ๊น์ง ํฌ์์ ๋ฅผ ์ถ๊ฐํฉ๋๋ค.
์์ฃผ ๋ฌป๋ ์ง๋ฌธ
๋จ์๊ฐ ๊ฒฐ๊ณผ์ ์ํฅ์ ์ฃผ๋์? ์๋์. ์ ๋ ฅํ ๋ถํผ ๋จ์(mL, ยตL, L) ๊ทธ๋๋ก ๊ฒฐ๊ณผ๊ฐ ๋์ต๋๋ค. ๋จ, ๊ฐ์ ๋จ์๋ก ์ผ๊ด๋๊ฒ ์ฌ์ฉํ๊ธฐ๋ง ํ๋ฉด ๋ฉ๋๋ค.
1X๊ฐ ์๋ ๋ค๋ฅธ ๋๋๋ก ํฌ์ํ ์ ์๋์? ์ด ๊ณ์ฐ๊ธฐ๋ ๋ชฉํ ๋๋๋ฅผ 1X๋ก ๊ฐ์ ํฉ๋๋ค. 10X๋ฅผ 2X๋ก ํฌ์ํ๋ ค๋ฉด ๋ฐฐ์๋ฅผ ๋ชฉํ ๋๋๋ก ๋จผ์ ๋๋ ๊ฐ(5)์ ๋ฐฐ์๋ก ์ ๋ ฅํ์ธ์.
ํฌ์์ก์ด ์ต์ข ๋ถํผ๋ณด๋ค ์กฐ๊ธ ์ ์ ์ด์ ๋? ๋์ถ ์คํก ์์ฒด๊ฐ ์ด๋ฏธ ๋ถํผ๋ฅผ ์ฐจ์งํ๊ธฐ ๋๋ฌธ์ ๋๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ํฌ์์ก ๋ถํผ๋ ์ต์ข ๋ถํผ์์ ์คํก ๋ถํผ๋ฅผ ๋บ ๊ฐ์ด ๋ฉ๋๋ค.