MCP๋กœ ์—ฐ๊ฒฐ โ†’

๊ณ„์‚ฐ ์ž…๋ ฅ

๊ณต์‹

๊ด‘๊ณ 

๊ฒฐ๊ณผ

์‚ฌ์šฉํ•  ๋†์ถ• ์Šคํ†ก ์–‘
10
+ 90 diluent (water/solvent)
์ตœ์ข… ๋ถ€ํ”ผ 100
ํฌ์„ ๋ฐฐ์ˆ˜ 10X
์Šคํ†ก ๋ถ€ํ”ผ 10
์ถ”๊ฐ€ํ•  ํฌ์„์•ก 90

์™„์ถฉ์•ก ํฌ์„ ๊ณ„์‚ฐ๊ธฐ๋ž€?

์‹คํ—˜์‹ค์—์„œ ์‚ฌ์šฉํ•˜๋Š” ์™„์ถฉ์•ก(buffer)์€ ๋ณด๊ด€ ๊ณต๊ฐ„์„ ์ค„์ด๊ณ  ์•ˆ์ •์„ฑ์„ ๋†’์ด๊ธฐ ์œ„ํ•ด ๋†์ถ• ์Šคํ†ก ํ˜•ํƒœ๋กœ ์ œ๊ณต๋˜๊ฑฐ๋‚˜ ๋ณด๊ด€๋˜๋Š” ๊ฒฝ์šฐ๊ฐ€ ๋งŽ์Šต๋‹ˆ๋‹ค(์˜ˆ: 10X TBE, 5X ๋กœ๋”ฉ ๋‹ค์ด, 50X TAE). ์‹ค์ œ๋กœ ์‚ฌ์šฉํ•  ๋•Œ๋Š” 1X ์ž‘์—… ๋†๋„๋กœ ํฌ์„ํ•ด์•ผ ํ•˜์ฃ . ์ด ๊ณ„์‚ฐ๊ธฐ๋Š” ์›ํ•˜๋Š” ์ตœ์ข… ๋ถ€ํ”ผ์— ๋งž์ถฐ ๋†์ถ• ์Šคํ†ก๊ณผ ํฌ์„์•ก(๋ฌผ ๋˜๋Š” ์šฉ๋งค)์„ ๊ฐ๊ฐ ์–ผ๋งˆ๋‚˜ ์„ž์–ด์•ผ ํ•˜๋Š”์ง€ ์ •ํ™•ํ•˜๊ฒŒ ์•Œ๋ ค์ค๋‹ˆ๋‹ค.

์‚ฌ์šฉ ๋ฐฉ๋ฒ•

์ค€๋น„ํ•˜๋ ค๋Š” ์ด ์ตœ์ข… ๋ถ€ํ”ผ์™€ ์Šคํ†ก์˜ ๋†์ถ• ๋ฐฐ์ˆ˜(10X ์Šคํ†ก์ด๋ฉด 10, 50X ์Šคํ†ก์ด๋ฉด 50์ฒ˜๋Ÿผ)๋ฅผ ์ž…๋ ฅํ•˜์„ธ์š”. ๊ณ„์‚ฐ๊ธฐ๋Š” ๋œ์–ด๋‚ด์•ผ ํ•  ๋†์ถ• ์Šคํ†ก์˜ ๋ถ€ํ”ผ์™€ ์ถ”๊ฐ€ํ•  ํฌ์„์•ก์˜ ๋ถ€ํ”ผ๋ฅผ ์•Œ๋ ค์ค๋‹ˆ๋‹ค. ๋‘ ๋ถ€ํ”ผ๋ฅผ ํ•ฉ์น˜๋ฉด ํ•ญ์ƒ ์ž…๋ ฅํ•œ ์ตœ์ข… ๋ถ€ํ”ผ๊ฐ€ ๋ฉ๋‹ˆ๋‹ค.

๊ณ„์‚ฐ ๊ณต์‹

ํฌ์„์€ ๋‹ค์Œ์˜ ๊ฐ„๋‹จํ•œ ๊ด€๊ณ„๋ฅผ ๋”ฐ๋ฆ…๋‹ˆ๋‹ค: $$V_{\text{์Šคํ†ก}} = \frac{V_{\text{์ตœ์ข…}}}{\text{๋ฐฐ์ˆ˜}}$$ ๋‚˜๋จธ์ง€ ๋ถ€ํ”ผ๊ฐ€ ํฌ์„์•ก์ด ๋ฉ๋‹ˆ๋‹ค: $$V_{\text{๋ฌผ}} = V_{\text{์ตœ์ข…}} - V_{\text{์Šคํ†ก}}$$ ์ด๋Š” ๋†๋„๋น„๊ฐ€ ๊ณง ๋†์ถ• ๋ฐฐ์ˆ˜์™€ ๊ฐ™์•„์ง€๋Š” \(C_1 V_1 = C_2 V_2\) ๊ณต์‹์„ ๊ทธ๋Œ€๋กœ ์ ์šฉํ•œ ๊ฒƒ์ž…๋‹ˆ๋‹ค.

๋†์ถ• 10X ๋ฒ„ํผ๋ฅผ ๋ฌผ๊ณผ ์„ž์–ด 1X ๋ฒ„ํผ ๋งŒ๋“ค๊ธฐ
10X ์Šคํ†ก ํฌ์„: ์Šคํ†ก 1์— ๋ฌผ 9๋ฅผ ๋”ํ•ด ์ตœ์ข… 1X ๋ถ€ํ”ผ๋ฅผ ๋งž์ถฅ๋‹ˆ๋‹ค.

๊ณ„์‚ฐ ์˜ˆ์‹œ

10X ์Šคํ†ก์œผ๋กœ 1X ์™„์ถฉ์•ก 100 mL๋ฅผ ๋งŒ๋“œ๋Š” ๊ฒฝ์šฐ: $$V_{\text{์Šคํ†ก}} = \frac{100}{10} = 10 \text{ mL}$$ $$V_{\text{๋ฌผ}} = 100 - 10 = 90 \text{ mL}$$ ์ฆ‰, 10X ์Šคํ†ก 10 mL์— ๋ฌผ 90 mL๋ฅผ ์„ž์œผ๋ฉด ๋ฉ๋‹ˆ๋‹ค.

์Šคํ†ก ๋ถ€ํ”ผ์™€ ๋ฌผ ๋ถ€ํ”ผ๊ฐ€ ํ•ฉ์ณ์ ธ ์ „์ฒด ์ตœ์ข… ๋ถ€ํ”ผ๋ฅผ ์ด๋ฃจ๋Š” ๊ฒƒ์„ ๋ณด์—ฌ์ฃผ๋Š” ๋ถ„ํ•  ๋ง‰๋Œ€
์ตœ์ข… ๋ถ€ํ”ผ๋Š” ์Šคํ†ก ๋ถ€๋ถ„(\(V_{\text{์ตœ์ข…}} / \text{๋ฐฐ์ˆ˜}\))๊ณผ ๋‚˜๋จธ์ง€ ๋ฌผ ๋ถ€๋ถ„์œผ๋กœ ๋‚˜๋‰ฉ๋‹ˆ๋‹ค.

ํ‘œ์ค€ ์‹คํ—˜์‹ค ๋ฒ„ํผ ์Šคํ†ก ๋†๋„

๋Œ€๋ถ€๋ถ„์˜ ๋ถ„์ž์ƒ๋ฌผํ•™ ๋ฒ„ํผ๋Š” ๊ณต๊ฐ„์„ ์ ˆ์•ฝํ•˜๊ณ  ์œ ํ†ต๊ธฐํ•œ์„ ์—ฐ์žฅํ•˜๊ธฐ ์œ„ํ•ด ๋†์ถ• ์Šคํ†ก์œผ๋กœ ๋ณด๊ด€๋˜์—ˆ๋‹ค๊ฐ€ ์‚ฌ์šฉ ์ง์ „์— 1X ์ž‘์—… ๋†๋„๋กœ ํฌ์„๋ฉ๋‹ˆ๋‹ค. ์•„๋ž˜ ํ‘œ์—๋Š” ์ผ๋ฐ˜์ ์ธ ๋ฒ„ํผ, ์Šคํ†ก์ด ์ผ๋ฐ˜์ ์œผ๋กœ ๊ณต๊ธ‰๋˜๊ฑฐ๋‚˜ ์ค€๋น„๋˜๋Š” ๋ฐฐ์ˆ˜, ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ  ์ผ๋ฐ˜์ ์ธ 1X ์šฉ๋„๊ฐ€ ๋‚˜์—ด๋˜์–ด ์žˆ์Šต๋‹ˆ๋‹ค.

๋ฒ„ํผ ์ „ํ˜•์ ์ธ ์Šคํ†ก ๋ฐฐ์ˆ˜ 1X ์ž‘์—… ์šฉ๋„
TBE (Tris-Borate-EDTA) 10X (๋˜๋Š” 5X) DNA/RNA์šฉ ์•„๊ฐ€๋กœ์Šค & ํด๋ฆฌ์•„ํฌ๋ฆด์•„๋งˆ์ด๋“œ ๊ฒ” ์ „๊ธฐ์˜๋™ ์‹คํ–‰ ๋ฒ„ํผ
TAE (Tris-Acetate-EDTA) 50X ์•„๊ฐ€๋กœ์Šค ๊ฒ” ์ „๊ธฐ์˜๋™ ์‹คํ–‰ ๋ฒ„ํผ; ํฐ DNA ๋‹จํŽธ & ํ›„์† ์ถ”์ถœ์— ์„ ํ˜ธ๋จ
PBS (์ธ์‚ฐ์—ผ ์™„์ถฉ ์‹์—ผ์ˆ˜) 10X ์„ธํฌ ์„ธ์ฒ™, ํฌ์„, ๋ฐ ์ƒ๋ฌผํ•™์  ๊ฒ€์ •์„ ์œ„ํ•œ ๋“ฑ์žฅ์„ฑ ๋ฒ„ํผ
TE (Tris-EDTA) 10X (์ข…์ข… 100X) DNA/RNA์˜ ์žฌํ˜„ํƒ ๋ฐ ๋ณด๊ด€ (1X = 10 mM Tris, 1 mM EDTA)
SDS-PAGE ๋กœ๋”ฉ ์—ผ๋ฃŒ (Laemmli) 5X (๋˜๋Š” 4X, 6X) ๋ณ€์„ฑ ๋‹จ๋ฐฑ์งˆ ๊ฒ”์˜ ์ƒ˜ํ”Œ ๋กœ๋”ฉ ๋ฒ„ํผ
๊ฒ” ๋กœ๋”ฉ ๋ฒ„ํผ (DNA) 5X / 6X DNA ์ƒ˜ํ”Œ ๋กœ๋”ฉ ์‹œ ์ด๋™ ์ถ”์  ๋ฐ ๋ฐ€๋„ ์ถ”๊ฐ€๋ฅผ ์œ„ํ•œ ๋กœ๋”ฉ ์—ผ๋ฃŒ

์ •ํ™•ํ•œ ์Šคํ†ก ๋ ˆ์‹œํ”ผ๋Š” ๊ณต๊ธ‰์—…์ฒด ๋ฐ ํ”„๋กœํ† ์ฝœ์— ๋”ฐ๋ผ ๋‹ค๋ฅด๋ฏ€๋กœ ํฌ์„ํ•˜๊ธฐ ์ „์— ๋ณ‘์— ์ธ์‡„๋œ ๋ฐฐ์ˆ˜๋ฅผ ํ•ญ์ƒ ํ™•์ธํ•˜์„ธ์š”. 1X ์šฉ์•ก์„ ์ค€๋น„ํ•˜๋ ค๋ฉด ์›ํ•˜๋Š” ์ตœ์ข… ๋ถ€ํ”ผ๋ฅผ ์Šคํ†ก ๋ฐฐ์ˆ˜๋กœ ๋‚˜๋ˆ„์–ด ๋†์ถ•์•ก์˜ ๋ถ€ํ”ผ๋ฅผ ๊ตฌํ•œ ๋‹ค์Œ ์ตœ์ข… ๋ถ€ํ”ผ๊นŒ์ง€ ํฌ์„์ œ๋ฅผ ์ถ”๊ฐ€ํ•ฉ๋‹ˆ๋‹ค.

์ž์ฃผ ๋ฌป๋Š” ์งˆ๋ฌธ

๋‹จ์œ„๊ฐ€ ๊ฒฐ๊ณผ์— ์˜ํ–ฅ์„ ์ฃผ๋‚˜์š”? ์•„๋‹ˆ์š”. ์ž…๋ ฅํ•œ ๋ถ€ํ”ผ ๋‹จ์œ„(mL, ยตL, L) ๊ทธ๋Œ€๋กœ ๊ฒฐ๊ณผ๊ฐ€ ๋‚˜์˜ต๋‹ˆ๋‹ค. ๋‹จ, ๊ฐ™์€ ๋‹จ์œ„๋กœ ์ผ๊ด€๋˜๊ฒŒ ์‚ฌ์šฉํ•˜๊ธฐ๋งŒ ํ•˜๋ฉด ๋ฉ๋‹ˆ๋‹ค.

1X๊ฐ€ ์•„๋‹Œ ๋‹ค๋ฅธ ๋†๋„๋กœ ํฌ์„ํ•  ์ˆ˜ ์žˆ๋‚˜์š”? ์ด ๊ณ„์‚ฐ๊ธฐ๋Š” ๋ชฉํ‘œ ๋†๋„๋ฅผ 1X๋กœ ๊ฐ€์ •ํ•ฉ๋‹ˆ๋‹ค. 10X๋ฅผ 2X๋กœ ํฌ์„ํ•˜๋ ค๋ฉด ๋ฐฐ์ˆ˜๋ฅผ ๋ชฉํ‘œ ๋†๋„๋กœ ๋จผ์ € ๋‚˜๋ˆˆ ๊ฐ’(5)์„ ๋ฐฐ์ˆ˜๋กœ ์ž…๋ ฅํ•˜์„ธ์š”.

ํฌ์„์•ก์ด ์ตœ์ข… ๋ถ€ํ”ผ๋ณด๋‹ค ์กฐ๊ธˆ ์ ์€ ์ด์œ ๋Š”? ๋†์ถ• ์Šคํ†ก ์ž์ฒด๊ฐ€ ์ด๋ฏธ ๋ถ€ํ”ผ๋ฅผ ์ฐจ์ง€ํ•˜๊ธฐ ๋•Œ๋ฌธ์ž…๋‹ˆ๋‹ค. ๋”ฐ๋ผ์„œ ํฌ์„์•ก ๋ถ€ํ”ผ๋Š” ์ตœ์ข… ๋ถ€ํ”ผ์—์„œ ์Šคํ†ก ๋ถ€ํ”ผ๋ฅผ ๋บ€ ๊ฐ’์ด ๋ฉ๋‹ˆ๋‹ค.

์ตœ์ข… ์—…๋ฐ์ดํŠธ: