Что такое калькулятор разведения буферов?
Лабораторные буферы часто поставляются или хранятся в виде концентрированных маточных растворов (например, 10X TBE, 5X буфер для нанесения проб или 50X TAE) — так они занимают меньше места и дольше сохраняют стабильность. Перед работой их нужно развести до рабочей концентрации 1X. Этот калькулятор точно подскажет, сколько концентрата и сколько растворителя (воды или другого растворителя) смешать, чтобы получить нужный конечный объём.
Как пользоваться
Введите общий конечный объём, который хотите приготовить, и кратность концентрации маточного раствора (10 для раствора 10X, 50 для раствора 50X и так далее). Калькулятор покажет, какой объём концентрата нужно отмерить и сколько растворителя добавить. Сумма этих двух объёмов всегда равна вашему конечному объёму.
Разбор формулы
Разведение подчиняется простому соотношению
$$V_{\text{конц}} = \frac{V_{\text{кон}}}{\text{кратность}}$$Оставшийся объём приходится на растворитель:
$$V_{\text{вода}} = V_{\text{кон}} - V_{\text{конц}}$$Это прямое применение формулы \(C_1 V_1 = C_2 V_2\), где отношение концентраций равно коэффициенту кратности.
Пример расчёта
Чтобы приготовить 100 мл буфера 1X из маточного раствора 10X:
$$V_{\text{конц}} = \frac{100}{10} = 10 \text{ мл концентрата}$$$$V_{\text{вода}} = 100 - 10 = 90 \text{ мл воды}$$Смешайте 10 мл раствора 10X с 90 мл воды.
Частые вопросы
Важны ли единицы измерения? Нет — результат выдаётся в тех же единицах объёма, которые вы ввели (мл, мкл, л), главное — соблюдать единообразие.
Можно ли развести не до 1X, а до другой концентрации? Калькулятор рассчитан на целевую концентрацию 1X. Чтобы развести 10X до 2X, сначала разделите кратность на нужную целевую концентрацию (то есть введите кратность 5).
Почему растворителя чуть меньше конечного объёма? Потому что концентрат сам по себе занимает часть объёма, поэтому объём растворителя равен конечному объёму минус объём концентрата.
Стандартные концентрации буферов в лабораторных запасах
Большинство буферов молекулярной биологии хранят в виде концентрированных запасов для экономии места и улучшения сроков хранения, а затем разбавляют до рабочей концентрации 1X непосредственно перед использованием. В таблице ниже приведены распространённые буферы, степень разведения их запасов, которые обычно поставляются или готовятся, и их стандартное применение в концентрации 1X.
| Буфер | Типичная степень разведения запаса | Применение при рабочей концентрации 1X |
|---|---|---|
| TBE (трис-борат-ЭДТА) | 10X (или 5X) | Буфер для электрофореза в агарозном и полиакриламидном геле для ДНК/РНК |
| TAE (трис-ацетат-ЭДТА) | 50X | Буфер для электрофореза в агарозном геле; предпочтителен для крупных фрагментов ДНК и последующей экстракции |
| PBS (фосфатный буферный раствор) | 10X | Промывка клеток, разбавления и изотонический буфер для биологических анализов |
| TE (трис-ЭДТА) | 10X (часто 100X) | Ресуспензия и хранение ДНК/РНК (1X = 10 мМ трис, 1 мМ ЭДТА) |
| Краситель для загрузки в гель SDS-PAGE (Лаэмли) | 5X (или 4X, 6X) | Буфер для загрузки образца в денатурирующие белковые гели |
| Буфер для загрузки геля (ДНК) | 5X / 6X | Краситель для отслеживания миграции и добавления плотности при загрузке образцов ДНК |
Точные рецепты запасов варьируются в зависимости от поставщика и протокола; всегда проверяйте степень разведения, указанную на этикетке, перед разбавлением. Для приготовления раствора в концентрации 1X разделите требуемый конечный объём на степень разведения запаса, чтобы найти объём концентрата, а затем добавьте разбавитель до конечного объёма.
