¿Qué es la calculadora de dilución de tampones?
En el laboratorio, los tampones suelen suministrarse o conservarse en forma de stocks concentrados (como TBE 10X, tampón de carga 5X o TAE 50X) para ahorrar espacio y mejorar su estabilidad. Antes de usarlos hay que diluirlos hasta una concentración de trabajo 1X. Esta calculadora te indica exactamente cuánto stock concentrado y cuánto diluyente (agua o disolvente) debes combinar para obtener el volumen final que necesites.
Cómo usarla
Introduce el volumen final total que quieres preparar y el factor de concentración de tu stock (10 para un stock 10X, 50 para un stock 50X, etc.). La calculadora te devuelve el volumen de stock concentrado que debes medir y el volumen de diluyente que debes añadir. Ambos volúmenes siempre suman tu volumen final.
La fórmula explicada
La dilución sigue una relación muy sencilla:
$$V_{stock} = \frac{\text{Volumen Final}}{\text{factor}}$$El volumen restante es el diluyente:
$$V_{agua} = V_{final} - V_{stock}$$Es una aplicación directa de \(C_1 V_1 = C_2 V_2\), donde la relación de concentraciones equivale al factor de dilución.
Ejemplo resuelto
Para preparar 100 mL de tampón 1X a partir de un stock 10X:
$$V_{stock} = \frac{100}{10} = 10 \text{ mL de stock}$$$$V_{agua} = 100 - 10 = 90 \text{ mL de agua}$$Mezcla 10 mL de stock 10X con 90 mL de agua.
Concentraciones Estándar de Stocks de Buffer de Laboratorio
La mayoría de los buffers de biología molecular se almacenan como stocks concentrados para ahorrar espacio y mejorar la vida útil, y luego se diluyen a una concentración de trabajo 1X inmediatamente antes de su uso. La siguiente tabla enumera buffers comunes, el factor de dilución en el que normalmente se suministran o preparan sus stocks, y su aplicación típica 1X.
| Buffer | Factor Typical de Stock | Uso de Trabajo 1X |
|---|---|---|
| TBE (Tris-Borato-EDTA) | 10X (o 5X) | Buffer de electroforesis en gel de agarosa y poliacrilamida para carrera de ADN/ARN |
| TAE (Tris-Acetato-EDTA) | 50X | Buffer de electroforesis en gel de agarosa; preferido para fragmentos de ADN grandes y extracción posterior |
| PBS (Solución Salina Amortiguada con Fosfato) | 10X | Lavado celular, diluciones, y buffer isotónico para ensayos biológicos |
| TE (Tris-EDTA) | 10X (a menudo 100X) | Resuspensión y almacenamiento de ADN/ARN (1X = 10 mM Tris, 1 mM EDTA) |
| Colorante de Carga SDS-PAGE (Laemmli) | 5X (o 4X, 6X) | Buffer de carga de muestra para geles de proteínas desnaturalizantes |
| Buffer de Carga de Gel (ADN) | 5X / 6X | Colorante de carga para rastrear la migración y agregar densidad al cargar muestras de ADN |
Las recetas exactas de stock varían según el proveedor y el protocolo; siempre confirme el factor impreso en la botella antes de diluir. Para preparar una solución 1X, divida el volumen final deseado por el factor de stock para encontrar el volumen de concentrado, y luego agregue el diluyente hasta el volumen final.
Preguntas frecuentes
¿Importa la unidad? No: el resultado se expresa en la misma unidad de volumen que introduzcas (mL, µL, L), siempre que la mantengas constante.
¿Puedo diluir hasta algo distinto de 1X? Esta herramienta asume un objetivo de 1X. Para diluir de 10X a 2X, divide primero el factor entre tu objetivo (usa 5 como factor).
¿Por qué el diluyente es un poco menor que el volumen final? Porque el stock concentrado ya aporta su propio volumen, así que el diluyente equivale al volumen final menos el volumen de stock.
