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Fórmula

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  1. Total DNA Yield

    Total DNA Yield: Calculadora de concentración de ADN

    C = concentration in ng/uL from the formula above; yield in micrograms

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Resultados

Concentración de ADN
250
ng/µL
Concentración 250 µg/mL
Rendimiento total (según el volumen) 12,5 µg

¿Qué es la calculadora de concentración de ADN?

Esta calculadora estima la concentración de ADN bicatenario (dsADN) de una muestra a partir de su lectura de absorbancia a 260 nm (A260), medida con un espectrofotómetro como un NanoDrop o un equipo UV de cubeta. Los ácidos nucleicos absorben con fuerza la luz ultravioleta a 260 nm, y esa absorbancia es directamente proporcional a la concentración, lo que la convierte en el método rápido por excelencia para cuantificar ADN en los laboratorios de biología molecular.

Haz de un espectrofotómetro atravesando una cubeta con muestra de ADN, con pico de absorbancia a 260
El ADN absorbe la luz UV con mayor intensidad a 260 nm, base de la medición A260.

Cómo utilizarla

Introduce el valor de absorbancia A260 que muestra tu espectrofotómetro. Indica el factor de dilución: si diluiste la muestra 1:10 antes de leerla, el factor es 10; si la mediste sin diluir, usa 1. De forma opcional, puedes introducir el volumen total de la muestra en microlitros para estimar también el rendimiento total de ADN. La herramienta devuelve la concentración en ng/µL (y su valor numéricamente equivalente en µg/mL), además de la masa total.

La fórmula explicada

El cálculo es $$\text{Concentración (ng/µL)} = A_{260} \times 50 \times \text{factor de dilución}$$ El factor 50 es la constante de conversión del dsADN: una muestra con paso óptico de 1 cm y una A260 de exactamente 1,0 contiene aproximadamente 50 ng/µL de ADN bicatenario. Para ADN monocatenario se usaría 33 y para ARN, 40, pero esta herramienta asume dsADN. El rendimiento total en microgramos es \(\text{concentración} \times \text{volumen} \div 1000\).

Diagrama de A260 por 50 por el factor de dilución igual a la concentración en nanogramos por microlitro
La fórmula de concentración multiplica A260 por la constante de 50 ng/µL y el factor de dilución.

Ejemplo resuelto

Supongamos que tu NanoDrop marca una A260 de 0,5 en una muestra diluida 1:10, con un volumen final de 50 µL. \(\text{Concentración} = 0{,}5 \times 50 \times 10 = 250\ \text{ng/µL}\) → 250 ng/µL. $$\text{Rendimiento total} = \frac{250 \times 50}{1000} = 12{,}5\ \text{µg}$$

Preguntas frecuentes

¿Por qué 50? Es el factor de extinción establecido empíricamente para el dsADN a 260 nm y con un paso óptico de 1 cm.

¿Qué factor de dilución pongo si no diluí la muestra? Usa 1.

¿Es lo mismo ng/µL que µg/mL? Sí: ambos valores son numéricamente idénticos, así que 250 ng/µL equivale a 250 µg/mL.

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