¿Qué es la calculadora de concentración de ARN?
Esta calculadora estima la concentración de una muestra de ARN a partir de su absorbancia a 260 nm (A260) medida en un espectrofotómetro UV, como un NanoDrop. Utiliza el factor de conversión estándar basado en la extinción para el ARN monocatenario, según el cual una A260 de 1,0 corresponde aproximadamente a 40 ng/µL de ARN. La herramienta es universal y sirve para cualquier laboratorio del mundo.
Cómo utilizarla
Introduce el valor de A260 medido, el factor de dilución aplicado antes de la lectura (usa 1 si la muestra se leyó sin diluir) y, de forma opcional, el volumen de la muestra en microlitros para calcular el rendimiento total de ARN. La calculadora devuelve la concentración en ng/µL (equivalente a µg/mL) y la cantidad total de ARN recuperado.
La fórmula explicada
Concentración de ARN (ng/µL):
$$\text{Concentración} = \text{A260} \times 40 \times \text{factor de dilución}$$El factor 40 es el coeficiente de extinción derivado empíricamente para el ARN monocatenario a 260 nm en una cubeta con paso óptico de 1 cm. Rendimiento total (µg):
$$\text{Rendimiento (}\mu\text{g)} = \frac{\text{concentración (ng/}\mu\text{L)} \times \text{volumen (}\mu\text{L)}}{1000}$$
Ejemplo práctico
Supongamos que \(\text{A260} = 0{,}25\), factor de dilución = 50 y volumen = 100 µL.
$$\text{Concentración} = 0{,}25 \times 40 \times 50 = 500 \;\text{ng/}\mu\text{L}$$$$\text{Rendimiento} = \frac{500 \times 100}{1000} = 50 \;\mu\text{g de ARN}$$
Preguntas frecuentes
¿Por qué 40 y no 50? El factor 50 se utiliza para el ADN bicatenario; el ARN monocatenario absorbe de forma ligeramente distinta, por lo que el valor aceptado es de 40 ng/µL por cada unidad de A260.
¿Y la pureza? La A260 por sí sola indica la concentración; comprueba la relación A260/A280 (~2,0 para ARN puro) y la A260/A230 para evaluar la presencia de contaminantes.
¿Influye el paso óptico? El factor asume un paso óptico estándar de 1 cm. Los equipos modernos de microvolumen normalizan automáticamente las lecturas a 1 cm.
