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输入计算

数学公式

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  1. Total RNA Yield

    Total RNA Yield: RNA浓度计算器

    Yield in micrograms = concentration (ng/uL) x sample volume (uL) / 1000.

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结果

RNA浓度
10
ng/µL
浓度(µg/mL) 10 µg/mL
RNA总产量 1 µg

RNA浓度计算器是什么?

这款计算器可根据样本在260 nm处的吸光度(A260)估算RNA浓度,A260通常由NanoDrop等紫外分光光度计测得。它采用单链RNA的标准消光换算系数:当A260为1.0时,约对应40 ng/µL的RNA。该工具通用,适用于全球任何实验室。

使用方法

输入测得的A260数值、读数前所用的稀释倍数(若样本未稀释直接测定,则填1),并可选择性地填入以微升(µL)为单位的样本体积,以计算RNA总产量。计算器会返回以ng/µL(等同于µg/mL)表示的浓度,以及回收得到的RNA总量。

公式详解

RNA浓度(ng/µL):

$$\text{Concentration} = \text{A260} \times 40 \times \text{Dilution} \;\;\text{(ng/}\mu\text{L)}$$

其中系数40是单链RNA在260 nm、1 cm光程比色皿条件下经实验测定的消光系数。总产量(µg):

$$\text{Yield (}\mu\text{g)} = \frac{\left(\text{A260} \times 40 \times \text{Dilution}\right) \times \text{Volume }(\mu\text{L})}{1000}$$
Diagram showing UV light passing through an RNA sample cuvette to a detector, with A260 absorbance multiplied by 40 and dilution factor
RNA concentration is derived from A260 absorbance using the 40 ng/µL factor and the dilution factor.

实例演算

假设A260 = 0.25,稀释倍数 = 50,体积 = 100 µL。则浓度:

$$0.25 \times 40 \times 50 = 500 \;\text{ng/}\mu\text{L}$$

总产量:

$$500 \times 100 \div 1000 = 50 \;\mu\text{g RNA}$$
Bar comparison of pure RNA at A260/A280 ratio 2.0 versus contaminated sample with lower ratio
An A260/A280 ratio near 2.0 indicates pure RNA, helping validate the calculated concentration.

常见问题

为什么用40而不是50?系数50适用于双链DNA;单链RNA的吸光特性略有不同,因此每单位A260对应40 ng/µL是公认的常数。

纯度如何判断?仅凭A260只能得到浓度;要评估纯度和污染情况,需查看A260/A280比值(纯RNA约为2.0)以及A260/A230比值。

光程有影响吗?该系数以标准1 cm光程为前提。现代微量检测仪器会自动将读数归一化到1 cm光程。

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