RNA 농도 계산기란?
이 계산기는 NanoDrop 같은 UV 분광광도계로 측정한 260 nm 흡광도(A260) 값을 바탕으로 RNA 시료의 농도를 추정합니다. 단일가닥 RNA에 적용되는 표준 흡광 환산 계수를 사용하며, A260가 1.0일 때 약 40 ng/µL의 RNA에 해당한다는 원리를 따릅니다. 특정 국가에 한정되지 않는 범용 도구로, 전 세계 어느 실험실에서나 그대로 사용할 수 있습니다.
사용 방법
측정한 A260 값과 측정 전에 적용한 희석 배수를 입력하세요(희석 없이 원액 그대로 측정했다면 1을 입력합니다). 시료 부피(µL)를 추가로 입력하면 총 RNA 회수량까지 계산됩니다. 계산기는 ng/µL 단위의 농도(µg/mL와 동일)와 회수된 RNA 총량을 함께 보여줍니다.
계산 공식 설명
RNA 농도(ng/µL):
$$\text{Concentration} = \text{A260} \times 40 \times \text{Dilution} \;\;\text{(ng/}\mu\text{L)}$$여기서 계수 40은 1 cm 광경로 셀에서 260 nm 파장에 대한 단일가닥 RNA의 경험적 흡광 계수입니다. 총 회수량(µg)은 다음과 같이 구합니다.
$$\text{Yield (}\mu\text{g)} = \frac{\left(\text{A260} \times 40 \times \text{Dilution}\right) \times \text{Volume }(\mu\text{L})}{1000}$$
계산 예시
A260 = 0.25, 희석 배수 = 50, 부피 = 100 µL인 경우를 가정해 봅시다. 농도 \(= 0.25 \times 40 \times 50 = 500\) ng/µL. 총 회수량 \(= 500 \times 100 \div 1000 = 50\) µg의 RNA입니다.
자주 묻는 질문
왜 50이 아니라 40인가요? 계수 50은 이중가닥 DNA에 사용됩니다. 단일가닥 RNA는 흡광 특성이 조금 달라서 A260 단위당 40 ng/µL가 공인된 상수로 쓰입니다.
순도는 어떻게 확인하나요? A260만으로는 농도만 알 수 있습니다. 순수한 RNA의 경우 A260/A280 비율이 약 2.0이며, A260/A230 비율과 함께 확인하면 오염 여부를 판단할 수 있습니다.
광경로 길이도 영향을 주나요? 이 계수는 표준 1 cm 광경로를 전제로 합니다. 최신 마이크로볼륨 장비는 측정값을 자동으로 1 cm 기준으로 보정해 줍니다.