DNA 농도 계산기란?
이 계산기는 NanoDrop이나 큐벳 방식의 UV 분광광도계로 측정한 260 nm 흡광도(A260) 값을 이용해 시료 속 이중가닥 DNA(dsDNA)의 농도를 추정합니다. 핵산은 260 nm에서 자외선을 강하게 흡수하며, 이 흡광도는 농도에 정비례합니다. 그래서 분자생물학 실험실에서 DNA를 빠르게 정량하는 표준 방법으로 널리 쓰입니다.
사용 방법
분광광도계 화면에 표시된 A260 흡광도 값을 입력하세요. 그다음 희석 배수를 입력합니다. 측정 전에 시료를 1:10으로 희석했다면 배수는 10이고, 희석하지 않고 원액 그대로 측정했다면 1을 입력하면 됩니다. 시료의 총 부피(µL)를 함께 입력하면 전체 DNA 수율까지 추정할 수 있습니다. 계산 결과로는 ng/µL 농도(수치상 동일한 µg/mL 포함)와 총 질량이 나옵니다.
공식 설명
계산식은 다음과 같습니다.
$$\text{농도 (ng/µL)} = A_{260} \times 50 \times \text{희석 배수}$$여기서 50은 dsDNA의 변환 상수로, 광경로 1 cm에서 A260이 정확히 1.0인 시료가 약 50 ng/µL의 이중가닥 DNA를 함유한다는 의미입니다. 단일가닥 DNA(ssDNA)에는 33, RNA에는 40을 사용하지만, 이 계산기는 dsDNA를 기준으로 합니다. 마이크로그램 단위의 총 수율은 다음과 같이 구합니다.
$$\text{Yield}_{\mu g} = \frac{C \times V}{1000}$$
계산 예시
예를 들어 NanoDrop에서 1:10으로 희석한 시료의 A260이 0.5로 측정되었고, 최종 부피가 50 µL라고 가정해 봅시다. 농도는 다음과 같습니다.
$$0.5 \times 50 \times 10 = 250 \text{ ng/µL}$$총 수율은 다음과 같이 계산됩니다.
$$\frac{250 \times 50}{1000} = 12.5 \text{ µg}$$자주 묻는 질문
왜 50인가요? 광경로 1 cm, 260 nm 조건에서 dsDNA에 대해 실험적으로 확립된 흡광 계수이기 때문입니다.
희석하지 않았다면 희석 배수는 얼마인가요? \(1\)을 입력하세요.
ng/µL와 µg/mL는 같은 값인가요? 네, 두 단위는 수치상 완전히 동일합니다. 따라서 250 ng/µL는 250 µg/mL와 같습니다.
