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輸入計算

數學公式

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  1. Total DNA Yield

    Total DNA Yield: DNA 濃度計算機

    C = concentration in ng/uL from the formula above; yield in micrograms

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結果

DNA 濃度
250
ng/µL
濃度 250 µg/mL
總產量(依體積計算) 12.5 µg

什麼是 DNA 濃度計算機?

這個計算機可以根據樣本在 260 nm 波長下的吸光值(A260),估算雙股 DNA(dsDNA)的濃度。A260 讀值通常由分光光度計量測而得,例如 NanoDrop 或使用比色皿的紫外光儀器。核酸在 260 nm 波長下對紫外光有強烈吸收,且吸光值與濃度成正比,因此這是分子生物學實驗室中最常用、也最快速的 DNA 定量方法。

分光光度計光束穿過 DNA 樣品比色皿,吸光度峰值在 260
DNA 在 260 nm 處對紫外光的吸收最強,這是 A260 測量的基礎。

使用方法

輸入分光光度計顯示的 A260 吸光值。接著填入稀釋倍數——如果你在量測前將樣本以 1:10 稀釋,倍數就是 10;若是直接量測未稀釋的原液,則填 1。你也可以選擇性地輸入樣本總體積(單位為微升 µL),以一併估算 DNA 的總產量。本工具會回傳以 ng/µL 表示的濃度(數值上等同於 µg/mL),以及 DNA 的總質量。

公式說明

計算方式為 濃度(ng/µL)= A260 × 50 × 稀釋倍數

$$\text{濃度 (ng/µL)} = A_{260} \times 50 \times \text{稀釋倍數}$$

其中 50 是 dsDNA 的轉換係數:在光徑長度為 1 cm 的條件下,當 A260 恰好為 1.0 時,樣本中約含有 50 ng/µL 的雙股 DNA。若是單股 DNA,係數應改為 33;RNA 則為 40。本工具預設計算的對象為雙股 DNA(dsDNA)。以微克(µg)表示的總產量則為 濃度 × 體積 ÷ 1000。

$$\text{產量}_{\mu g} = \frac{C \times V}{1000}$$
A260 × 50 × 稀釋倍數 = 濃度(奈克每微升)的示意圖
濃度公式是 A260 乘以 50 ng/µL 常數再乘以稀釋倍數。

實際範例

假設你的 NanoDrop 在 1:10 稀釋的樣本上讀到 A260 為 0.5,最終體積為 50 µL。則濃度 = \(0.5 \times 50 \times 10 = \) 250 ng/µL。總產量 = \(250 \times 50 \div 1000 = 12.5\) µg。

常見問題

為什麼是 50?這是雙股 DNA 在 260 nm 波長、1 cm 光徑長度下,經實驗驗證所建立的消光係數。

如果我沒有稀釋,稀釋倍數要填多少?填 1。

ng/µL 跟 µg/mL 是一樣的嗎?是的——兩者在數值上完全相同,所以 250 ng/µL 就等於 250 µg/mL。

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