RNA सांद्रता कैलकुलेटर

गणना दर्ज करें

A260 अवशोषण

डाइल्यूशन फैक्टर

सैंपल आयतन (µL, वैकल्पिक)

सूत्र (फॉर्मूला)

Show calculation steps (1)

1. Total RNA Yield

   

   Yield in micrograms = concentration (ng/uL) x sample volume (uL) / 1000.

परिणाम

RNA सांद्रता

10

ng/µL

सांद्रता (µg/mL)	10 µg/mL
कुल RNA यील्ड	1 µg

RNA सांद्रता कैलकुलेटर क्या है?

यह कैलकुलेटर आपके RNA सैंपल की सांद्रता का अनुमान 260 nm पर मापे गए अवशोषण (A260) के आधार पर लगाता है, जिसे NanoDrop जैसे UV स्पेक्ट्रोफोटोमीटर पर मापा जाता है। यह सिंगल-स्ट्रैंडेड RNA के लिए मानक एक्सटिंक्शन-आधारित रूपांतरण फैक्टर का उपयोग करता है, जिसके अनुसार 1.0 का A260 लगभग 40 ng/µL RNA के बराबर होता है। यह टूल सार्वभौमिक है और दुनिया भर की किसी भी लैब में उपयोग किया जा सकता है।

इसका उपयोग कैसे करें

मापा गया A260 मान दर्ज करें, रीडिंग लेने से पहले इस्तेमाल किया गया डाइल्यूशन फैक्टर डालें (यदि सैंपल बिना डाइल्यूट किए पढ़ा गया हो तो 1 का उपयोग करें), और कुल RNA यील्ड निकालने के लिए वैकल्पिक रूप से सैंपल का आयतन माइक्रोलीटर में डालें। कैलकुलेटर सांद्रता ng/µL में (जो µg/mL के बराबर होती है) और प्राप्त कुल RNA की मात्रा बताता है।

फॉर्मूला समझें

RNA सांद्रता:

$$\text{RNA सांद्रता (ng/}\mu\text{L)} = \text{A260} \times 40 \times \text{डाइल्यूशन फैक्टर}$$

यहाँ फैक्टर 40, 1 cm पाथलेंथ वाले सेल में 260 nm पर सिंगल-स्ट्रैंडेड RNA के लिए प्रयोगों से प्राप्त एक्सटिंक्शन गुणांक है। कुल यील्ड:

$$\text{कुल यील्ड (}\mu\text{g)} = \frac{\text{सांद्रता (ng/}\mu\text{L)} \times \text{आयतन (}\mu\text{L)}}{1000}$$

RNA concentration is derived from A260 absorbance using the 40 ng/µL factor and the dilution factor.

हल किया गया उदाहरण

मान लीजिए A260 = 0.25, डाइल्यूशन फैक्टर = 50, और आयतन = 100 µL है। सांद्रता:

$$\text{सांद्रता} = 0.25 \times 40 \times 50 = 500 \;\text{ng/}\mu\text{L}$$

कुल यील्ड:

$$\text{कुल यील्ड} = \frac{500 \times 100}{1000} = 50 \;\mu\text{g RNA}$$

An A260/A280 ratio near 2.0 indicates pure RNA, helping validate the calculated concentration.

अक्सर पूछे जाने वाले सवाल

40 क्यों और 50 क्यों नहीं? फैक्टर 50 का उपयोग डबल-स्ट्रैंडेड DNA के लिए होता है; सिंगल-स्ट्रैंडेड RNA थोड़े अलग ढंग से अवशोषण करता है, इसलिए प्रति A260 यूनिट 40 ng/µL ही मान्य स्थिरांक है।

शुद्धता का क्या? अकेला A260 केवल सांद्रता बताता है; संदूषण का आकलन करने के लिए A260/A280 अनुपात (शुद्ध RNA के लिए ~2.0) और A260/A230 की जाँच करें।

क्या पाथलेंथ मायने रखती है? यह फैक्टर मानक 1 cm पाथलेंथ मानकर चलता है। आधुनिक माइक्रोवॉल्यूम उपकरण रीडिंग को स्वतः 1 cm के अनुसार सामान्यीकृत कर देते हैं।