什么是蛋白质浓度计算器？
本计算器可根据蛋白质溶液在 280 nm 处的吸光度（A280，由紫外分光光度计测得）估算其浓度。芳香族氨基酸残基——色氨酸、酪氨酸，以及在较小程度上参与的半胱氨酸——会在 280 nm 处吸收紫外光，因此吸光度与蛋白质浓度成正比。只要知道蛋白质的质量消光系数，就能依据比尔-朗伯定律将读数换算成 mg/mL（毫克每毫升）。
使用方法
只需输入三个数值：实测吸光度（A280）、质量消光系数 \(\varepsilon\)（单位为 mL·mg⁻¹·cm⁻¹），以及比色皿的光程（通常为 1 cm）。在"1 mg/mL = 1 AU"的通用假设下，\(\varepsilon\) 常取 1.0；而对于 IgG 抗体，\(\varepsilon\) 通常取约 1.4。计算器会同时给出 mg/mL 和 µg/mL 两种单位的浓度结果。
公式详解
比尔-朗伯定律可表示为 \(A = \varepsilon \times C \times l\)，其中 \(A\) 为吸光度，\(\varepsilon\) 为消光系数，\(C\) 为浓度，\(l\) 为光程。对浓度进行变形即可得到
$$C = \dfrac{A_{280}}{\varepsilon \times l}$$当光程为 1 cm 时，公式可简化为 \(C = \dfrac{A_{280}}{\varepsilon}\)。
实例演算
假设你在 1 cm 比色皿中测得某抗体的 \(A_{280} = 0.700\)，其 \(\varepsilon = 1.4\) mL·mg⁻¹·cm⁻¹。代入公式可得
$$C = \dfrac{0.700}{1.4 \times 1} = 0.5 \text{ mg/mL}$$即 500 µg/mL。
常见问题
应该使用哪个消光系数？请使用与你目标蛋白质相对应的质量消光系数（通常可从 ProtParam 工具或供应商提供的数据表中获取）。1.0 只是一个粗略的默认值；对于 IgG 抗体，1.4 是较为典型的取值。
为什么要在 280 nm 处测量？芳香族氨基酸在 280 nm 处有强烈吸收，因此它成为无标记蛋白质定量的标准波长。
光程长度重要吗？非常重要。大多数比色皿的光程为 1 cm，但微量检测仪器（例如 NanoDrop）使用的光程更短，务必准确填入对应的光程值。
