什么是连接反应计算器？
连接反应计算器用于计算建立连接反应时所需的插入DNA用量，使插入片段与载体按你设定的摩尔比配比。由于DNA片段越长，单个分子的质量就越大，因此不能简单地把等质量的插入片段和载体混在一起——必须根据二者的相对长度和目标摩尔比来换算插入片段的质量。本工具具有通用性，适用于标准分子克隆操作，不受实验室或国家限制。
使用方法
输入你计划使用的载体质量（单位：纳克 ng）、载体长度（碱基对 bp）、插入片段长度（bp），以及你想要的插入片段:载体摩尔比（粘性末端连接通常以 3:1 的插入:载体比例作为起点）。计算器会返回需要与载体一起加入的插入DNA质量（ng）。
公式解析
所需插入片段质量的计算公式为：
$$\text{插入片段质量} = \frac{\text{摩尔比} \times \text{插入片段长度} \times \text{载体质量}}{\text{载体长度}}$$公式中的（插入片段长度 / 载体长度）这一比值，可将 1:1 的质量比换算为 1:1 的摩尔比，再乘以目标摩尔比即可得到所需用量。计算结果与载体质量采用相同的质量单位（ng）。
实例演算
假设你使用 50 ng 的 5000 bp 载体，想与 1000 bp 的插入片段按 3:1 的摩尔比连接。那么插入片段质量 =
$$\frac{3 \times 1000 \times 50}{5000} = \frac{150000}{5000} = 30 \text{ ng}$$也就是说，反应体系中需要加入 30 ng 的插入片段。
常见问题
应该用什么摩尔比？ 粘性末端（互补末端）连接通常采用 3:1 的插入:载体比例；常用范围为 1:1 到 5:1（平末端连接可更高）。如果克隆效果不理想，可以多尝试几种比例。
结果的单位是 ng 吗？ 是的。插入片段质量采用与载体质量相同的单位，这里即为纳克（ng）。
长度是否包含载体骨架？ 请使用每个线性化分子的完整碱基对长度——载体应包含其骨架，插入片段应为整个片段的长度。
