계산 입력

공식

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Nuclease-Free Water Volume

Water fills the remaining volume after all components and template. N = Reactions x (1 + Excess/100); template scaled by N.

결과

전체 마스터 믹스 용량

275

µL (for 11 effective reactions)

성분	용량 (µL)
버퍼	27.5
dNTP	5.5
정방향 프라이머	13.75
역방향 프라이머	13.75
DNA 중합효소	1.38
주형 DNA	11
뉴클레아제 무첨가 정제수	202.12

PCR 마스터 믹스 계산기란?

PCR 마스터 믹스 계산기는 여러 개의 중합효소 연쇄반응(PCR) 튜브를 한 번에 준비할 때 각 시약을 얼마나 넣어야 하는지 계산해 주는 도구입니다. 튜브마다 시약을 하나하나 분주하는 대신, 공통으로 쓸 마스터 믹스를 한꺼번에 만들어 나눠 담는 방식이죠. 이 계산기는 반응 수에 피펫팅 여유분을 더해 모든 시약을 자동으로 스케일링하므로 막판에 시약이 모자랄 일이 없습니다.

하나의 공용 마스터 믹스 튜브가 여러 반응 튜브로 나뉘는 과정을 보여주는 다이어그램 — 마스터 믹스를 한 번 만든 뒤 모든 반응 튜브에 균등하게 분주합니다.

사용 방법

1회 반응 용량, 반응 수, 그리고 피펫팅 여유분(보통 5~10%)을 입력하세요. 시약별로는 스톡 농도와 반응 내 목표 최종 농도를 입력합니다. 그러면 계산기가 각 시약의 용량, 주형(template) 용량, 그리고 부피를 맞추는 nuclease-free water(뉴클레아제 무첨가 정제수) 양까지 한 번에 알려줍니다.

공식 풀이

각 시약 용량은 희석 관계식 $C_1 V_1 = C_2 V_2$에서 나옵니다. 마스터 믹스의 경우 유효 반응 수 $n = \text{반응 수} \times \left(1 + \frac{\text{여유분}}{100}\right)$을 곱해 줍니다:

$$V = \frac{C_{\text{최종}} \times V_{\text{반응}} \times n}{C_{\text{스톡}}}$$

단, 각 성분의 스톡과 최종 농도 단위는 반드시 서로 일치해야 합니다(X는 X끼리, mM은 mM끼리, µM은 µM끼리, U/µL은 U/µL끼리).

성분 부피와 물의 합이 총 반응 부피가 됨을 보여주는 누적 막대 다이어그램 — 각 성분의 부피는 희석 공식으로 구하며, 나머지는 물로 최종 부피까지 채웁니다.

계산 예시

25 µL 반응 10개를 여유분 10%로 준비한다면 $n = 10 \times 1.10 = 11$입니다. 10X 버퍼를 1X로 만들려면

$$\frac{1 \times 25 \times 11}{10} = 27.5\ \text{µL}$$

가 필요하고, dNTP를 10 mM에서 0.2 mM로 맞추려면

$$\frac{0.2 \times 25 \times 11}{10} = 5.5\ \text{µL}$$

가 듭니다. 전체 믹스 용량은 $25 \times 11 = 275\ \text{µL}$이며, 물은 모든 시약과 주형을 넣고 남은 부피를 채웁니다.

자주 묻는 질문

피펫팅 여유분은 왜 넣나요? 팁 끝이나 튜브 벽에 묻어 사라지는 미세한 손실이 쌓이기 때문입니다. 5~10%를 더 잡아두면 마지막 튜브까지 온전한 반응액이 들어갑니다.

물 용량이 음수로 나오면 어떻게 하나요? 시약 용량의 합이 이미 반응 용량을 넘었다는 뜻입니다. 최종 농도를 낮추거나, 스톡 농도를 높이거나, 반응 용량을 늘려 보세요.

특정 성분을 비워 둘 수 있나요? 해당 성분의 스톡을 0으로 설정하면 제외됩니다. 그 시약 용량은 0이 되고 물이 그만큼을 대신 채웁니다.

PCR 마스터 믹스 계산기