OD600 ์ธํฌ ๋ฐ๋ ๊ณ์ฐ๊ธฐ๋?
600nm์์์ ๊ดํ ๋ฐ๋(OD600)๋ ์ก์ฒด ๋ฐฐ์์ก ์ ์ธํฌ ์๋ฅผ ๋น ๋ฅด๊ณ ๋นํ๊ดด์ ์ผ๋ก ์ถ์ ํ๋ ๋ฐฉ๋ฒ์ ๋๋ค. ๋ถ๊ด๊ด๋๊ณ๋ ์ธํฌ๋ฅผ ์ง์ ์ธ๋ ๊ฒ์ด ์๋๋ผ ๋น์ ์ฐ๋ ์ ๋๋ฅผ ์ธก์ ํ๊ธฐ ๋๋ฌธ์, ์คํ์ ์ผ๋ก ๊ตฌํ ๋ณํ ๊ณ์๋ฅผ ์ด์ฉํด OD600 ๊ฐ์ ์ธํฌ ๋ฐ๋(mL๋น ์ธํฌ ์)๋ก ํ์ฐํด์ผ ํฉ๋๋ค. ์ด ๊ณ์ฐ๊ธฐ๋ ์ ๋ ฅํ OD600 ๊ฐ์ ๋ณํ ๊ณ์๋ฅผ ๊ณฑํ๊ณ , ํ์ํ๋ค๋ฉด ๋ฐฐ์ ๋ถํผ๊น์ง ๊ณฑํด ์ ์ฒด ์ธํฌ ์๋ฅผ ๊ณ์ฐํด ์ค๋๋ค.
์ฌ์ฉ ๋ฐฉ๋ฒ
OD600 ์ธก์ ๊ฐ, ์ฌ์ฉ ์ค์ธ ์๋ฌผ์ข ๊ณผ ๊ธฐ๊ธฐ์ ๋ง๋ ๋ณํ ๊ณ์, ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ (์ ํ ์ฌํญ์ผ๋ก) mL ๋จ์์ ๋ฐฐ์ ๋ถํผ๋ฅผ ์ ๋ ฅํ์ธ์. ๋์ฅ๊ท (E. coli)์ ๊ฒฝ์ฐ OD600 = 1.0์ด ๋๋ต 8ร10โธ cells/mL์ ํด๋นํ๋ค๋ ๊ฒฝํ ๋ฒ์น์ด ๋๋ฆฌ ์ฐ์ด๋ฉฐ, ๊ทธ๋์ ๊ธฐ๋ณธ ๊ณ์๋ 800,000,000์ผ๋ก ์ค์ ๋์ด ์์ต๋๋ค. ์๋ฌผ์ข , ๊ท ์ฃผ, ์์ฅ ๋จ๊ณ, ๋ถ๊ด๊ด๋๊ณ ์ข ๋ฅ์ ๋ฐ๋ผ ๊ณ์๊ฐ ๋ฌ๋ผ์ง๋ฏ๋ก, ์ ํํ ์คํ์๋ ํํ ๊ณ์๋ฒ์ด๋ ์ธํฌ ๊ณ์๊ธฐ๋ก ์ง์ ๋ณด์ ํ๋ ๊ฒ์ด ์ข์ต๋๋ค.
๊ณ์ฐ ๊ณต์ ํ์ด
ํต์ฌ ๊ด๊ณ์์ $$\text{Cells/mL} = \text{OD600} \times f$$ ์ด๋ฉฐ, ์ฌ๊ธฐ์ f๋ ๋ณํ ๊ณ์(OD ๋จ์๋น mL๋น ์ธํฌ ์)์ ๋๋ค. ์ ์ฒด ์ธํฌ ์๋ $$\text{Total Cells} = \text{Cells/mL} \times \text{Volume (mL)}$$ ๋ก ๊ตฌํฉ๋๋ค. ์ด ๊ด๊ณ๊ฐ ๊ฑฐ์ ์ ํ์ผ๋ก ์ ์ง๋๋ ๊ฒ์ OD๊ฐ ๋ฎ์ ๋(๋ณดํต ์ฝ 0.8 ๋ฏธ๋ง)๋ฟ์ ๋๋ค. ๋ฐ๋๊ฐ ๋ ๋์ ๋๋ ์๋ฃ๋ฅผ ํฌ์ํ ๋ค ์ธก์ ํ๊ณ , ํฌ์ ๋ฐฐ์๋ฅผ ๋ค์ ๊ณฑํด ์ ํ ๊ตฌ๊ฐ ์์์ ๊ณ์ฐํด์ผ ํฉ๋๋ค.
๊ณ์ฐ ์์
์๋ฅผ ๋ค์ด ๋์ฅ๊ท ๋ฐฐ์์ก์์ \(f = 8 \times 10^8\) cells/mL๋ฅผ ์ฌ์ฉํด OD600 = 0.5๋ฅผ ์ธก์ ํ๋ค๊ณ ํฉ์๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ฉด ์ธํฌ ๋ฐ๋๋ $$0.5 \times 800{,}000{,}000 = 400{,}000{,}000 \text{ cells/mL} \ (4 \times 10^8)$$ ์ด ๋ฉ๋๋ค. 10 mL ๋ฐฐ์์ก์ด๋ผ๋ฉด ์ ์ฒด ์ธํฌ ์๋ $$400{,}000{,}000 \times 10 = 4{,}000{,}000{,}000 \ (4 \times 10^9)$$ ๊ฐ์ ๋๋ค.
์์ฃผ ๋ฌป๋ ์ง๋ฌธ(FAQ)
์ ์ฐ๋ฆฌ ๊ท ์ฃผ๋ ๋ณํ ๊ณ์๊ฐ ๋ค๋ฅธ๊ฐ์? ์ธํฌ ํฌ๊ธฐ, ๋ชจ์, ์์ง ์ ๋, ๊ธฐ๊ธฐ์ ๊ดํ ํน์ฑ์ด ๋ชจ๋ ์ฐ๋์ ์ํฅ์ ์ฃผ๊ธฐ ๋๋ฌธ์, ๊ฐ ์คํ์ค์ ์์ฒด ๊ณ์๋ฅผ ์ง์ ๋ณด์ ํด์ผ ํฉ๋๋ค.
ํจ๋ชจ๋ ๋๋ฌผ ์ธํฌ์๋ ์ฌ์ฉํ ์ ์๋์? ๊ฐ๋ฅํฉ๋๋ค. ๋ค๋ง ํด๋น ์ธํฌ์ ๋ง๊ฒ ๋ณด์ ๋ ๊ณ์๋ฅผ ์ฌ์ฉํด์ผ ํฉ๋๋ค. ํจ๋ชจ์ OD ๋จ์๋น ๊ณ์๋ ์ธ๊ท ๋ณด๋ค ํจ์ฌ ํฝ๋๋ค.
OD600์ด 1์ ๋๋๋ฐ, ๊ฒฐ๊ณผ๊ฐ ์ ํํ๊ฐ์? ์ ํํ์ง ์์ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ด ๋์ต๋๋ค. ์๋ฃ๋ฅผ ์ ํ ๊ตฌ๊ฐ(ํํ OD < 0.8)์ผ๋ก ํฌ์ํด ์ธก์ ํ ๋ค, ๊ฒฐ๊ณผ์ ํฌ์ ๋ฐฐ์๋ฅผ ๊ณฑํ์ธ์.