OD600 세포 밀도 계산기란?
600nm에서의 광학 밀도(OD600)는 액체 배양액 속 세포 수를 빠르고 비파괴적으로 추정하는 방법입니다. 분광광도계는 세포를 직접 세는 것이 아니라 빛의 산란 정도를 측정하기 때문에, 실험적으로 구한 변환 계수를 이용해 OD600 값을 세포 밀도(mL당 세포 수)로 환산해야 합니다. 이 계산기는 입력한 OD600 값에 변환 계수를 곱하고, 필요하다면 배양 부피까지 곱해 전체 세포 수를 계산해 줍니다.
사용 방법
OD600 측정값, 사용 중인 생물종과 기기에 맞는 변환 계수, 그리고 (선택 사항으로) mL 단위의 배양 부피를 입력하세요. 대장균(E. coli)의 경우 OD600 = 1.0이 대략 8×10⁸ cells/mL에 해당한다는 경험 법칙이 널리 쓰이며, 그래서 기본 계수는 800,000,000으로 설정되어 있습니다. 생물종, 균주, 생장 단계, 분광광도계 종류에 따라 계수가 달라지므로, 정확한 실험에는 평판 계수법이나 세포 계수기로 직접 보정하는 것이 좋습니다.
계산 공식 풀이
핵심 관계식은 $$\text{Cells/mL} = \text{OD600} \times f$$ 이며, 여기서 f는 변환 계수(OD 단위당 mL당 세포 수)입니다. 전체 세포 수는 $$\text{Total Cells} = \text{Cells/mL} \times \text{Volume (mL)}$$ 로 구합니다. 이 관계가 거의 선형으로 유지되는 것은 OD가 낮을 때(보통 약 0.8 미만)뿐입니다. 밀도가 더 높을 때는 시료를 희석한 뒤 측정하고, 희석 배수를 다시 곱해 선형 구간 안에서 계산해야 합니다.
계산 예시
예를 들어 대장균 배양액에서 \(f = 8 \times 10^8\) cells/mL를 사용해 OD600 = 0.5를 측정했다고 합시다. 그러면 세포 밀도는 $$0.5 \times 800{,}000{,}000 = 400{,}000{,}000 \text{ cells/mL} \ (4 \times 10^8)$$ 이 됩니다. 10 mL 배양액이라면 전체 세포 수는 $$400{,}000{,}000 \times 10 = 4{,}000{,}000{,}000 \ (4 \times 10^9)$$ 개입니다.
자주 묻는 질문(FAQ)
왜 우리 균주는 변환 계수가 다른가요? 세포 크기, 모양, 응집 정도, 기기의 광학 특성이 모두 산란에 영향을 주기 때문에, 각 실험실은 자체 계수를 직접 보정해야 합니다.
효모나 동물 세포에도 사용할 수 있나요? 가능합니다. 다만 해당 세포에 맞게 보정된 계수를 사용해야 합니다. 효모의 OD 단위당 계수는 세균보다 훨씬 큽니다.
OD600이 1을 넘는데, 결과가 정확한가요? 정확하지 않을 가능성이 높습니다. 시료를 선형 구간(흔히 OD < 0.8)으로 희석해 측정한 뒤, 결과에 희석 배수를 곱하세요.
