什麼是 OD600 細胞密度換算器?
600 nm 波長下的光密度(OD600)是估算液體培養物中細胞數量的快速、非破壞性方法。由於分光光度計量測的是光的散射,而非直接計數細胞,因此需要透過實驗測定的換算係數,將 OD600 讀值轉換成細胞密度(每毫升細胞數,cells/mL)。本換算器會將你的 OD600 乘以該係數,並可選擇再乘上培養體積,得出總細胞數。
使用方法
輸入你的 OD600 讀值、適用於該菌種與儀器的換算係數,以及(選填)以 mL 為單位的培養體積。針對大腸桿菌(E. coli),一個常被引用的經驗法則是:OD600 = 1.0 約對應 \(8\times10^{8}\) cells/mL,因此預設係數設為 800,000,000。不同物種、菌株、生長階段與分光光度計都會得出不同的係數,若要求精準,請以平板計數或細胞計數儀進行校正。
公式說明
核心關係為 $$\text{Cells/mL} = \text{OD600} \times f$$ 其中 f 為換算係數(每單位 OD 對應的每毫升細胞數)。總細胞數 = cells/mL × 體積(mL)。此關係只有在低 OD(通常低於約 0.8)時才近似線性;當密度較高時,請先稀釋樣本,再乘回稀釋倍數,以維持在線性範圍內。
實例計算
假設你以 \(f = 8\times10^{8}\) cells/mL 量測一個大腸桿菌培養物,讀得 OD600 = 0.5。則細胞密度 $$0.5 \times 800{,}000{,}000 = 400{,}000{,}000 \text{ cells/mL} \,(4\times10^{8})$$ 若培養體積為 10 mL,總細胞數 $$400{,}000{,}000 \times 10 = 4{,}000{,}000{,}000 \text{ 個細胞} \,(4\times10^{9})$$
常見問題
為什麼我的菌株換算係數不一樣?細胞大小、形狀、聚集程度以及儀器光學特性都會影響光散射,因此每個實驗室都應校正自己的專屬係數。
可以用在酵母菌或哺乳動物細胞嗎?可以,但必須使用為這些細胞校正過的係數——酵母菌每單位 OD 對應的係數遠高於細菌。
我的 OD600 超過 1,結果準確嗎?很可能不準。請將樣本稀釋到線性範圍(通常 OD < 0.8),再將結果乘上稀釋倍數。